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人自然抗性相关巨噬细胞蛋白1荧光定量检测试剂盒说明书
浏览次数:251发布日期:2021/5/12

人自然抗性相关巨噬细胞蛋白1荧光定量检测试剂盒说明书

点击次数:251 发布时间:2021/5/12
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人自然抗性相关巨噬细胞蛋白1荧光定量检测试剂盒说明书
 
1、 试剂盒简介货为了适应人自然抗性相关巨噬细胞蛋白1荧光定量检测试剂盒快速检测和疫病研究的需要,本公司参照 OIE 国际标准中规定的引物序列,经多次实验及系统优化,开发了本试剂盒。应用本试剂盒进行检测具有快速、灵敏、特异、准确、安全操作简单、应用广泛和高通量检测等特点及优点。2、试剂盒组成:
试剂盒组成包括核酸提取试剂和核酸扩增试剂,具体组成参见表 1: s
 
表 1:试剂盒组成(50test/盒)
  
 
注意事项
 
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
 
2.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
 
3.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔di一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请乘以总稀释倍数(×n×5)。
 
4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
 
5.底物请避光保存。
 
6.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定以酶标仪读数为准.
 
7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
 
8.本试剂不同批号组分不得混用。
 
9.不能使用过期产品。
 
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。 
 
每个样品测试反应体系配制见下表 2。
           
 表 2 每个样品测试反应体系配制表
     
 
操作流程
 
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
 
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
 
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
 
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
 
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
 
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
 
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
 
样本:血清 血浆 组织匀浆等液体样本
 
标记物:血清 血浆 组织匀浆等
 
应用:仅用科研实验检测定量,定性检
 
检测方法:夹心法
 
技术要求:全程按说明书步骤检测,操作规范,专业,仪器设备齐全。
 
规格:48t/96t 
 
性状:液体 
 
运输方式:快递发货 
 
有效期:6个月品
 
特点:灵敏性高,---性,吸附均匀,吸附性好,回收利用率高,是一款可以让您放心选购的产品。
 
使用范围:此产品供科研实验使用,不得用于---。
 
用途:用于测定人血清、血浆、组织及相关液体样本中的含量或活性。
 
样本处理及要求:
 
1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
 
2.  血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
 
3.  组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
 
4.  细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:本公司提供试剂盒免费代测服务。需要其他检测试剂盒请咨询销售人员。
 
试剂盒组成及试剂配制 :
 
1.酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。 
 
2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
 
3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
 
4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
 
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
 
6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
 
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
 
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 
 
9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
 
10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。