小鼠白细胞介素2（IL-2）试剂盒使用说明书

--本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素 2（IL-2）含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白细胞介素 2（IL-2）水平。用纯化的小鼠

白细胞介素 2（IL-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细

胞介素 2（IL-2），再与 HRP 标记的白细胞介素 2（IL-2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗

体复合物，经过*洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在

酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素 2（IL-2）呈正相关。用

酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中小鼠白细胞介素 2

（IL-2）浓度。

试剂盒组成

1 30 倍浓缩洗涤液

20ml×1 瓶

7 终止液

6ml×1 瓶

2 酶标试剂

6ml×1 瓶

8 标准品（2400ng/L） 0.5ml×1 瓶

3 酶标包被板

4 样品稀释液

5 显色剂 A 液

6 显色剂 B 液

标本要求

12 孔×8 条

6ml×1 瓶

6ml×1 瓶

6ml×1/瓶

9 标准品稀释液

10 说明书

11 封板膜

12 密封袋

1.5ml×1 瓶

1 份

2 张

1 个

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能

马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀

释。

1200 ng/L 

600 ng/L 

300 ng/L 

150 ng/L 

75 ng/L 

5 号标准品

4 号标准品

3 号标准品

2 号标准品

1 号标准品

150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液

150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、

待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl，待测样品孔中先加样品稀释液 40µl，

然后再加待测样品 10µl（样终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽

量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此

重复 5 次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。

7. 温育：操作同 3。

8. 洗涤：操作同 5。

9. 显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色

15 分钟.

10. 终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止

液后 15 分钟以内进行。