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小鼠ELISA试剂盒原理与样本处理
浏览次数:884发布日期:2020-10-21

小鼠ELISA试剂盒原理:

 本小鼠ELISA试剂盒系由预包被猪瘟病毒重组E2蛋白的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成,应用酶联免疫法(ELISA)原理检测猪血清、血浆样本中猪瘟病毒抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本,经温育后若样品中含有猪瘟病毒抗体,则将与酶标板上抗原结合,经洗涤除去未结合的其他成分后;再加入酶标记物,与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶标记物,在孔中加TMB底物液,与酶反应形成蓝色产物,显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关;加入终止液终止反应后,产物变为黄色;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值,即可知样品是否含有猪瘟病毒抗体。

小鼠ELISA试剂盒技术原理:

(1). 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。

(2). 结合在固相载体表面a的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。

(3). 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。

(4). 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。

(5). 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。

(6). 加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为小鼠ELISA试剂盒有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重复性好。以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。

小鼠ELISA试剂盒样本处理及要求:

    1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

    2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

    3. 细胞培养物上清或小鼠ELISA试剂盒生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

    注:标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。