PCR检测试剂盒原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因（DNA）片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的（1+E）n（0＜E＜1，扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。

　　

　　技术特点：

　　1、PCR检测试剂盒准确可靠，临床双盲对照试验＞1000例，结果与金标准测序法比对，结果大于99%；

　　2、高灵敏：可检测低至10ng的人基因组DNA；

　　3、快速：整个检测流程只需3小时；

　　4、简便：试剂盒提供预混好的试剂，使体系配置操作简便；

　　5、防污染；

　　6、高特异性：双重特异性组成，保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需*配对，才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对，在延伸中产生荧光。

　　

　　PCR检测试剂盒的使用方法：

　　1、稀释PCR阳性对照：

　　a、注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照；

　　b、标记6个离心管，分别为7，6，5，4，3，2；

　　c、用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR模板稀释液；

　　d、在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡1分钟，得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用；

　　e、换枪头，在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用；

　　f、换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用；

　　g、重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

 

　　2、样品DNA的制备：

　　a、如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC，一个是NC。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号或第5号再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品，则PC和NC的体积也必须是200μL。

　　b、用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。

　　

　　3、设置qPCR反应：

　　a、如果只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照，6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复，则反应设置数量相应增加2或3倍；

　　b、产品仅用于科研在标记管中按下表加入各成分。