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这些基础资料可以让您更好的了解什么是单克隆抗体!
浏览次数:210发布日期:2022-05-29
  单克隆抗体是一种免疫学技术,将产生抗体的单个B淋巴细胞同骨髓肿瘤细胞进行细胞融合,获得既能产生抗体,又能无限增殖的细胞,并以此抗体。是仅由一种类型的细胞出来的抗体,对应于多克隆抗体、多株抗体——由多种类型的细胞出来的一种抗体。
 
  单克隆抗体的基本原理:
  哺乳类细胞DNA合成可分为两条途径,①从头(denovo)合成途径,利用磷酸核糖焦磷酸和尿嘧啶,可被氨基蝶呤(A)阻断;②补救(salvag-e)合成途径,在次Xanthine磷酸核糖转化酶(HGPRT)存在下利用次Xanthine(H)和胸腺嘧啶(T)。
  单克隆抗体技术的流程为:脾细胞和骨髓瘤细胞在聚乙二醇(PEG)作用下发生细胞融合;加人HAT选择培养基后,未融合的骨髓瘤细胞因其从头合成途径被氨基蝶呤阻断,而又缺乏HGPRT不能利用补救途径合成DNA,从而死亡;未融合的脾细胞难以在体外培养而死亡;融合细胞因从脾细胞获得HGPRT,故可在HAT选择培养基中存活和增殖。
 
  抗体的结构与功能:
  1、抗原:进入动物体内对肌体的免疫系统产生刺激作用的外源物质。
  包括:蛋白质、多糖、核酸、病毒、细菌、各种细胞等。
  特点:外源性、结构性、特异性。
  2、抗体:
  动物免疫系统分泌的中和或消除抗原物质的影响的糖蛋白,存在于血清中,本质是免疫球蛋白。
  动物脾脏有上百万个B淋巴 细胞,一个细胞就是一个克隆,它针对抗原上的一个抗原决定族产生的抗体是单克隆抗体。
  一种抗原通常具有多个不同的抗原决定族,因此能刺激多个B淋巴细胞产生相应的单克隆抗体,因此血清中的抗体是针对不同抗原决定族的单克隆抗体混合物,称为多克隆抗体。
 
  单克隆抗体的优点:
  1、杂交瘤可以在体外存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断地高特异性、高均一性的抗体。
  2、可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体。
  3、由于可能得到“无*”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如IRMA和ELISA等。
  4、由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能,可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗。