PCR温度循环仪（又称PCR仪或热循环仪）是分子生物学实验中用于执行聚合酶链式反应（PCR）的关键设备。它通过精确控制温度变化，实现DNA模板的变性、引物退火和产物延伸的循环过程，从而在体外高效扩增特定DNA片段。正确操作仪器不仅能确保实验结果的准确性和重复性，还能延长设备使用寿命。

操作流程详解

以下是综合多个品牌PCR仪（如伯乐Bio-Rad、ABI Veriti等）的通用操作步骤：

一、开机与准备

接通电源，打开仪器背部主开关。

仪器自动进行自检（SelfTest），完成后进入待机状态（Ready）。

将配制好的PCR反应管或96孔板放入样品槽中，关闭热盖。

二、程序设置方式

不同型号PCR仪提供多种程序创建方式，主要包括手动编辑和自动向导两种。

三、核心参数配置

在设置程序时，需重点配置以下参数：

热盖温度：通常设为99–105℃，防止样品蒸发；压力默认约90N。

初始变性：94–95℃维持2–5分钟，确保模板全部解链。

循环步骤：

变性：94–95℃，15–30秒；

退火：根据引物Tm值设定，通常50–65℃，30秒；

延伸：72℃，按1 kb/min计算时间。

循环次数：一般25–35次，过多可能导致非特异产物积累。

最终延伸：72℃，5–10分钟，确保所有产物完整合成。

四、运行与监控

设置完成后，点击 Run → Start Now 启动程序。

可通过屏幕查看当前运行状态、剩余时间等信息。

如需暂停或终止，使用 Pause 或 Stop 功能。

五、关机与维护

程序结束后，及时取出样品。

清洁样品槽和热盖，保持仪器干燥。

定期校准温度以保证准确性。

建议

使用前务必阅读说明书，了解具体型号的功能限制（如zui大升温速率、支持管型等）。

定期维护和校准仪器，确保温度控制精度。

若出现非特异条带，可尝试调整退火温度或启用梯度功能寻找zuiyou条件。

实验完成后及时清理样品槽，避免污染。