评估小鼠ELISA试剂盒的重复性需通过以下关键指标和实验方法：

一、‌板内重复性（批内变异）‌

同一批次内对同一样本重复检测（建议≥5次），计算变异系数（CV%），优质试剂盒要求CV<5%‌。

示例：Invitrogen VCAM-1试剂盒通过14次重复检测，CV值验证重现性。

二、‌板间重复性（批间变异）‌

不同批次试剂盒检测同一样本，CV应<10%。

需控制加样量、温育时间、洗板次数等参数以减少操作误差。

三、‌多维度验证‌

‌阴性/阳性对照‌：每板需设置阴性和弱阳性对照，确保信号阈值（如阳性OD>1.5，空白OD<0.3）。

‌稀释线性‌：样本回收率需在80%-120%范围内。

四、‌稳定性测试‌

长期保存后（如15天）重复检测，结果需与初始数据一致。

五、操作建议

‌预实验‌：使用已知浓度标准品验证标曲线性（R²≥0.99）。

‌自动化设备‌：采用自动洗板机并增加30秒浸泡步骤，提升精度。‌

通过上述方法可全面评估试剂盒的重复性，确保实验数据可靠性。‌