当培养原代细胞时，重要的是要记住，他们不是细胞系，不能同等对待。这里有六个在原代细胞培养中的常见错误，以及如何纠正这些错误。供大家参考。

错误1：一小管原代细胞在水浴中解冻一段时间

纠正1：原代细胞对解冻过程非常敏感，因此将小瓶置于37℃水浴中，保持并轻轻旋转直到内容物刚刚解冻是很重要的。然后应立即从水浴中取出小瓶，并转移到无菌操作台。确保您的培养瓶在解冻前已经准备就绪，以便可以立即用于接种细胞，并置于培养箱中。

错误2：解冻match小瓶后直接离心原代细胞

纠正2：我们不建议在解冻后离心细胞，因为离心程序比少量的DMSO残留更有害。记住，在恢复原代细胞后的第二天更换培养基以去除任何残留的DMSO。

错误3：允许原代细胞变得过于融合

纠正3：当生长至100％汇合时，原代细胞可以变得衰老。记住，原代细胞不是100％纯，因此重要的是尽量减少污染细胞的生长。我们建议在细胞达到90-95％融合时，对原代细胞进行传代培养。

错误4：传代原代细胞时过度胰蛋白酶消化

纠正4：当细胞传代时，使用低浓度的胰蛋白酶并在显微镜下密切监测细胞。此外，记得在胰蛋白酶消化后*中和细胞中的胰酶，因为任何活性的胰蛋白酶都将损伤细胞。