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有关牛血清白蛋白试剂盒的操作步骤,以下有详细说明
浏览次数:449发布日期:2021-09-24
  牛血清白蛋白是来自牛的血清白蛋白,是一种小而稳定的中等非反应性蛋白,它通常用作测定蛋白质浓度的标准品和免疫组织化学中的阻断剂。在免疫组织化学中,组织切片通常与BSA阻断剂孵育以结合非特异性结合位点。BSA也用作细胞和微生物培养物中的营养物质。在限制性消化中,BSA用于在DNA消化过程中稳定一些酶,并防止酶对反应管,移液管吸头和其他血管的粘附。
 
  牛血清白蛋白试剂盒的操作步骤:
  1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
  2、设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
  3、待测样本孔先加生物素10μL,再加待测样本50μL;
  4、随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
  5、弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5 次(也可用洗板机洗板)。
  6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  7、每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm 波长处测定各孔的OD值。
 
  洗板方法:
  1、手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
  2、自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
 
  结果判断:
  绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。