酵母菌落直接PCR检测试剂盒主要用于酵母单杂pAbAi质粒重组基因组后的鉴定实验，同时提供PCR Mix以及通用引物混合物，无需额外准备，可快速高效完成PCR扩增，产物可用于DNA测序。亦适用于其它重组酵母菌的PCR检测实验。如需检测的样品为游离质粒而非基因组重组质粒，建议使用阳性克隆检测试剂盒（SK2420）进行PCR扩增。

 

　　酵母菌落直接PCR检测试剂盒的优势：

　　1、特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测。

　　2、重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证。

　　3、灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。

　　4、实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。

 

　　操作步骤：

　　1、准备PCR预混液：根据检测克隆数，等比例扩大配制体积。

　　2、吸取5μL酵母快速裂解液加入PCR管中。

　　3、用无菌牙签或10μL枪头刮取适量酵母菌落（直径1-2mm）悬浮在裂解液中。

　　4、吹打或者震荡混匀后室温静置5 min。即为裂解产物。

　　注意：大于2000bp的基因片段作为Bait，建议将裂解产物再于-20℃冷冻10min或-80℃速冻1min，可有效提高PCR产率。

　　5、在裂解产物中加入45μL PCR预混液（含引物），PCR扩增。

 

　　注意事项：

　　1、菌落PCR前，先刮取部分菌落保存，可以有效避免样品污染和丢失。

　　2、新鲜菌落的PCR成功率接近100%。如生长期较长的菌落，请先进行预实验。