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这些关于耐药的PC3细胞培养的小知识,你一定要牢牢掌握
浏览次数:527发布日期:2021-03-26
  耐药的PC3细胞的原理:
  在不加任何条件下直接冻存细胞时,细胞内和外环境中的水都会形成冰晶,能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等,能引起细胞死亡。如向培养液加入保护剂,可使冰点降低。在缓慢的冻结条件下,能使细胞内水份在冻结前透出细胞。贮存在-130℃以下的低温中能减少冰晶的形成。
  细胞复苏时速度要快,使之迅速通过细胞最易受损的-5~0℃,细胞仍能生长,活力受损不大,目前常用的保护剂为二甲亚砜(DMSO)和甘油,它们对细胞无毒性,分子量小,溶解度大,易穿透细胞。
 
  耐药的PC3细胞培养小知识:
  MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。
  其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。
  二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。
  在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。
  它的特点是灵敏度高、经济。
  293细胞   T25培养瓶  贴壁生长    90% DMEM 、10% FBS        5% CO2,95% AIR    37 ℃
  293FT细胞 T25培养瓶  贴壁生长    90% 高糖DMEM 、10% FBS    5% CO2,95% AIR    37 ℃