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植物elisa进口试剂盒使用步骤和前期样本要求说明
浏览次数:535发布日期:2020-09-09
  植物elisa进口试剂盒前期样本要求:
 
  1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
 
  2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存或根据存放,时间做相应温度调整,但应避免反复冻融,(由于样本种类过多,每个单位处理方式不一样,本说明书不做详细介绍)。
 
  植物elisa进口试剂盒操作步骤:
 
  1、使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
 
  2、根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
 
  3、加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育45分钟。
 
  4、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
 
  5、每孔加入100ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
 
  6、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
 
  7、每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育5分钟。避免光照。
 
  8、取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
 
  9、在450nm波长处测定各孔的OD值。
 
  植物elisa进口试剂盒使用注意事项:
 
  1、 从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
 
  2、严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
 
  3、为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。
 
  4、不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
 
  5、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。植物维生素E(VE)ELISA试剂盒进口
 
  6、所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按生物废弃物处理。终止液为2M硫酸,使用时必须注意安全。
 
  7、各步骤加样均应使用加样器,并经常校准其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
 
  8、每次试验测定的同时做标准曲线,。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔zui高浓度的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n)。
 
  9、配制试剂时,要用旋涡混合仪混匀。加入孔内的试剂,充分混匀对测试结果尤为重要,使用微量振荡器(使用zui低频率),如无微量振荡器,可在反应前手工轻轻晃动酶标板1分钟,例如做圆周动作,使加入孔中的反应液混匀。
 
  10、实验用酶标仪应严格按使用说明书规范操作,并在使用前充分预热。
 
  11、手工洗板应注意:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。