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载脂蛋白ELISA检测试剂盒注意事项与标本处理方法
浏览次数:892发布日期:2020-09-02

标本处理:

1、某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。

2、建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。

3、若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。

4、使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致载脂蛋白ELISA检测试剂盒实验结果偏差。

5、实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。

6、若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。

7、本公司只对载脂蛋白ELISA检测试剂盒本身负责,不对因使用该载脂蛋白ELISA检测试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本

实验条件如下:

1、固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维   素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。

2、包被抗体或抗原的选择:将抗体或抗原吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一   般要求PH在9.0~9.6之间。

3、 酶标记抗体工作浓度的选择:先用直接载脂蛋白ELISA检测试剂盒进行初步效价的滴定。然后再固定其   它条件或采取“方阵法",在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。

 4、酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体有潜在的致癌作用,载脂蛋白ELISA检测试剂盒应注意防护。

注意事项:

1、 从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2、严格按照说明书的操作进行,试验结果载脂蛋白ELISA检测试剂盒判定必须以酶标仪读数为准。

3、为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。

4、不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

5、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。

6、所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按生物废弃物处理。终止液为2M硫酸,使用时必须注意安全。

7、各步骤加样均应使用加样器,并经常校准其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

8、每次试验测定载脂蛋白ELISA检测试剂盒的同时做标准曲线,。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔zui高浓度的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n)。