大鼠ELISA试剂盒操作程序总结：
 

　　计算
 

　　以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
 

　　想要获得更为准确的实验数据，我们不仅要严格按要求来实验，还要步骤正确，不然出现一点偏差都会导致数据产生不对，下面给大家讲解一下大鼠大鼠ELISA试剂盒操作步骤：
 

　　1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
 

　　2、设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
 

　　3、样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
 

　　4、除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
 

　　5、弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液(350μL)，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
 

　　6、每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
 

　　7、每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
 

　　大鼠ELISA试剂盒操作注意事项：
 

　　1、大鼠ELISA试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
 

　　2、浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
 

　　3、各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
 

　　4、请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD 值)，请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
 

　　5、 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
 

　　6、底物请避光保存。
 

　　7、严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
 

　　8、所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
 

　　9、本试剂不同批号组分不得混用。