PCR检测试剂盒原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因（DNA）片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的（1+E）n（0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。

 

　　技术特点：

　　1、PCR试剂盒准确可靠，临床双盲对照试验＞1000例，结果与金标准测序法比对，结果*性大于99%。

　　2、高灵敏：可检测低至10ng的人基因组DNA。

　　3、快速：整个检测流程只需3小时。

　　4、简便：试剂盒提供预混好的试剂，使体系配置操作简便。

　　5、防污染

　　6、产品仅用于科研高特异性：双重特异性组成，保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需*配对，才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对，在延伸中产生荧光。

 

　　PCR检测试剂盒的实验目的：

　　1、掌握PCR法扩增目的基因片段的基本原理与方法；

　　2、通过PCR验证目的基因片段是否插入质粒中；

　　3、充分理解本学期三次分子实验的原理、联系与意义。

 

　　实验原理：

　　分子生物学实验技术基本原理：

　　PCR（Polymerase Chain Reaction）即聚合酶链式反应，是指在DNA聚合酶催化下，以母链DNA为模板，以特定引物为延伸起点，通过变性、退火、延伸等步骤，体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程。是一项DNA体外合成放大技术，能快速特异地在体外扩增一定长度的DNA片段。可用于基因分离克隆，序列分析，基因表达调控，基因多态性研究等许多方面。

　　在高温（94℃）下，待扩增的靶DNA双链受热变性成为两条单链DNA模板；而后在低温（37～55℃）情况下，两条人工合成的寡核苷酸引物与互补的单链DNA模板结合，形成部分双链；在普通Taq酶的Zui适温度（72℃）下，以引物3’端为合成的起点，以d NTP为原料，沿模板以5’→3’方向延伸，合成DNA新链。这样，每一双链的DNA模板，经过一次解链、退火、延伸三个步骤的热循环后就成了两条双链DNA分子。如此反复进行，每一次循环所产生的DNA均能成为下一次循环的模板，每一次循环都使两条人工合成的引物间的DNA特异区拷贝数扩增一倍，PCR产物得以2n的形式迅速扩增，经过25～30个循环后，理论上可使基因扩增10 倍以上。