大家在实验中多多少少会有些问题出现，复孔的稀释步骤也不例外。那么ELISA检测实验中复孔的稀释到底有多关键呢？近日，有位客户来电表明了自己的实验疑惑：“设计ELISA复孔检查时，是对同一个样品作两次稀释，再分别加到板上的两个孔，还是只稀释一次，然后吸取两次分别加到两个孔？前者似乎把稀释时的误差也考虑到了，但做出来的结果两个孔相关挺大的。而较常使用的是哪种稀释方法？”

为了减小误差，是先稀释再加样。而针对这位客户所遇到的疑问，上海抚生生物公司技术人员是这样解说的：

1. 前者测的是稀释和移液的误差，后者只有移液误差。

2. 一般都是稀释一次，分两孔吧。同浓度的分复孔。

3. 由于是从同一原液稀释，一般不考虑稀释误差(稀释误差是存在的)，都是稀释到想要的倍数直接分孔(而不是一一稀释，这样可以使稀释误差减小)。

 4. 复孔是为了排除移液体积，板的影响，以及其他系统误差的，要求复孔的浓度是一致的。稀释后分孔能满足此要求，一一稀释不能。