植物根茎、叶子等；剪刀；螺盖离心管或锁盖离心管或96孔板；1ml玻璃比色皿；分光光度计或酶标仪；水浴锅或干浴器；离心机

 

植物检测试剂盒操作步骤：

 

1、 样本处理：

取新鲜植物组织，清洗干净，擦干，剪碎，迅速称取， 按照20mg重量加入1ml Pro裂解液的比例加入Pro裂解液（建议使用1.5ml螺口离心管或锁盖离心管），沸水浴或干浴处理20分钟 (期间间歇混匀)，10000rpm离心 2分钟，上清即为脯氨酸提取液，4℃保存备用。待测提取液如不能及时测定，应置于-20℃保存，1-2天内稳定。

 

2、 Pro显色液的配制：

把小管装的茚三酮粉末，全部加入到茚三酮溶解液中，剧烈混匀至*溶解，即配成Pro显色液。注意：Pro显色液具有一定腐蚀性，请小心操作。

 

3、 配制系列脯氨酸标准溶液：

取1ml 试剂1-Pro裂解液全部加入到装有Pro标准液的小管中，混匀后*溶解，即配成的Pro标准液（100mg/ml）。

取1 μl 100mg/ml 标准液加入到1ml Pro裂解液中，即配成100μg/ml Pro标准液待用。参照下表配制1-6号不同浓度的Pro标准溶液。

植物检测试剂盒使用注意事项：

 

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

 

2.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

 

3.请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。

 

4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

 

5.底物请避光保存。

 

6.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

 

7.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

 

8.本试剂不同批号组分不得混用。

 

10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

 

ELISA检测试剂盒实验结果判断：

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。

3、以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性，P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑，P／N小于1．5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照，与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。

 

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求：

① 易挥发、低燃点的试剂要密封，放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气，水发生反应的物质要密封，并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂，应将其固体或晶体密封保存，不宜长期存放其水溶液，亚硫酸，氢硫酸溶液要密封存放，钾，钠，白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存，其相应的溶液较固体更易反应，所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封，放于阴凉通风处保存。