猪细胞系是指从猪的组织中分离并经过初次传代成功后，能够持续培养并进行多次传代的细胞群体。这些细胞系可以用于研究猪的生物学特性、疾病模型、药物筛选以及异种移植等领域。猪细胞系污染的常见原因包括：

一、操作流程污染：

1、‌样本处理不当‌

组织取样时若碘酒消毒后脱碘不chedi，残留碘会直接抑制细胞生长。操作过程中未严格遵循无菌规范（如超净台未充分紫外线消毒）易引入环境微生物。

2、‌器材灭菌缺陷‌

培养瓶、移液管等器材若高压蒸汽灭菌不chedi，可能残留大肠杆菌或葡萄球菌等常见污染菌。

二、环境与操作风险：

1、培养箱维护不足：长期未更换水盘、托盘未酒精消毒，导致霉菌滋生。

2、超净台管理混乱：物品堆积过多，紫外线无法全覆盖，气流稳定性受影响。

3、人员着装不规范：细胞房内人员密集，未按要求穿戴无菌服、口罩，引入外源污染物。

三、试剂与细胞自身问题：

血清与培养基污染：血清灭活处理不当可能破坏营养成分，或冻存细胞本身携带污染物。

细胞系交叉污染：购买的猪乳腺上皮细胞若身份错误（如被Hela细胞污染），可能导致实验结果偏差。

四、支原体污染：

由于支原体没有细胞壁，常规的过滤和消毒方法难以去除，且其体积小，不易被常规显微镜检测到，因此在细胞培养中较为常见。

五、细胞来源问题：

如果从不可靠的供应商或未经验证的细胞库获取细胞，可能本身就带有污染。

六、抗生素滥用：

长期在培养基中添加抗生素，虽然能抑制某些细菌，但也会促进耐药菌株的生长，掩盖支原体等隐性污染，最终导致大规模污染爆发。

七、关键防控建议：

1、‌血清筛选‌：使用无血清培养基或经支原体检测的血清。

2、‌定期检测‌：每2周通过DAPI染色或PCR法排查支原体。

3、‌分区操作‌：严格区分组织处理区与细胞培养区，避免交叉污染。

预防猪细胞系污染的措施包括严格遵守无菌操作规程、定期清洁和消毒实验室环境、使用高质量的试剂和培养基、定期检测细胞系的纯度和身份、避免交叉污染、以及合理使用抗生素等。