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测定意义

土壤中的铵态氮可被土壤胶体吸附，呈交换性铵状态氮肥，也可溶解在土壤溶液中，能直接被植物吸收利用，属于速效性氮素。

测定原理

土壤中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯作用，生成水溶性染料靛酚蓝，在625nm处有特征吸收峰，吸光值与铵态氮含量成正比。

自备实验用品及仪器

天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、振荡仪。

试剂组成和配制

提取液：液体110mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：粉剂×2瓶，4℃避光保存。临用前根据用量每瓶加4mL双蒸水溶解，现配现用。

试剂二：液体8mL×1瓶，4℃避光保存。

试剂三：液体2mL×1瓶，4℃保存。

样本处理

按照土壤质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g新鲜土样，加入1mL提取液），振荡提取1h，10000g ，25℃离心10min，取上清液待测。

测定操作表

1. 分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至625nm，蒸馏水调零。

2. 操作表

计算公式

1. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线：y =0.1522x-0.0009，R2= 0.9993

NH4+—N含量（mg/kg 鲜重）=（△A+0.0009）÷ 0.1522÷W

                     = 6.57×（△A+0.0009）÷W

W  ：样本质量，g

2. 用96孔板测定的计算公式如下

标准曲线：y = 0.0761x-0.0009，R2= 0.9993

NH4+—N含量（mg/kg鲜重）=（△A+0.0009）÷ 0.0761÷W

                     = 13.14×（△A+0.0009）÷W

W：样本质量，g

注意事项

1. 试剂一必须避光低温保存，配制好的试剂一4℃保存不能超过20天。

2. 浸提液最好在当日完成测定，如果不能完成，可冷冻保存，但不能超过两天。

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