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6T-CEM (T细胞白血病细胞)说明

  • 更新时间:  2022-04-25
  • 产品型号:  
  • 简单描述
  • 6T-CEM (T细胞白血病细胞)说明公司正在出售的产品:人CXC趋化因子受体7(CXCR7)elisa分析检测试剂盒
    人CXC趋化因子受体7(CXCR7)elisa检测试剂盒
    人C多肽(CP)elisa分析检测试剂盒
    人C多肽(CP)elisa检测试剂盒
    人C-反应蛋白(CRP)elisa检测试剂盒
详细介绍

细胞培养操作规程:产品仅用于科研
一.培养基及培养冻存条件准备:
1
)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640GIBCO,货号21875-091)90%;优质胎牛血清,10%
2
)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5% 温度:37,培养箱湿度为70%-80%
3
)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1
)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2
)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1215的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

产品属性:

产品名称

规格

分类

货号

6T-CEM (T细胞白血病细胞)说明

1×10cells/T25培养瓶

细胞系

FS-01X6328

产品介绍:

名称  6T-CEM (T细胞白血病细胞) (STR鉴定正确)
 
别称 6-T CEM

种属 人类

年龄(性别) 女性, 311个月

组织来源 T淋巴细胞;急性淋巴细胞白血病

生长特性 悬浮细胞

细胞形态 淋巴母细胞样

背景描述 6T-CEM细胞是一个CCRF-CEM [CCRF   CEM]6-硫抗性变种;HPRTHGPRT缺陷并能分泌高滴度的免疫抑制因子。6T-CEM细胞通常用作T细胞杂交瘤的融合对象。

生物安全等级 2

生长培养基 RPMI-164010% FBS1% P/S

推荐传代比例 3×10^5-5×10^5cells/mL

推荐换液频率 2~3/

冻存条件

冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度:液氮

培养条件

气相:空气,95%CO25%

温度:37

注意事项 该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。

保藏机构 ATCC; CRL-8296

冷冻保存细胞之方法:

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃   30~60 分钟-20 ℃30 分钟* → -80 ℃16~18 小时(或隔夜)液氮槽vaporphase 长期储存。

冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ –80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

培养操作:
1
)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37水浴中迅速摇晃解冻,加 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2
)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1.
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3.
6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4.
将细胞悬液按 12 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3
)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1.
细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm
离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3.
将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
(敏感菌株)冻干粉   平沙绿僵菌

不动杆菌   构巢曲霉

苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae   洛格酵母

园弧青霉=桔灰青霉   委内瑞拉链霉菌

松生拟层孔菌   珊瑚色诺卡氏菌
DNA
复制抑制因子抗体     卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD6抗体

糖蛋白0脂酶D抗体     卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD5抗体

G蛋白α抑制蛋白2抗体     卷曲螺旋结构域蛋白98抗体

胶质源性连接蛋白抗体     卷曲螺旋结构域蛋白96抗体

鹅细小病毒GPV抗体     卷曲螺旋结构域蛋白94抗体
6T-CEM (T
细胞白血病细胞)说明大鼠可溶性Toll样受体6(sTLR6)elisa分析检测试剂盒

大鼠可溶性Toll样受体2(sTLR2)elisa分析检测试剂盒

大鼠可溶性E选择素(sE-selectin)elisa分析检测试剂盒

大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)elisa分析检测试剂盒

大鼠可溶性CD80(sCD80)elisa分析检测试剂盒



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