WR19L细胞
WR19L细胞
二、细胞培养操作
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中,加入约8 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。 3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
三、培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,用新鲜的培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代。
9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
公司正在出售的产品:
glucagon like peptide 2,GLP2 ELISA Kit | 戈氏放线菌PCR试剂盒 |
PSIP1 ELISA kit | 传染性皮下和造血器官坏死病病毒PCR检测试剂盒 |
CD5 ELISA Kit | 山羊疱疹病毒2型PCR试剂盒 |
Acylation Stimulating Protein,ASP ELISA Kit | 鸭瘟病毒(DPV)核suan检测试剂盒 |
glucagon-like peptide 1 receptor,GLP1R ELISA kit | 诺如病毒G5型RT-PCR试剂盒 |
Cluster Of Differeiation 83(CD83)ELISA Kit | 米黑根毛霉PCR试剂盒 |
fibronection related aigen,FRA ELISA Kit | 米黑根毛霉PCR检测试剂盒 |
salmonella typhi(ST)aibody IgG ELISA kit | 疟原虫PCR试剂盒 |
Collagen Type XII(COL12)ELISA Kit | 牛源性成分(Bovine)核suan检测试剂盒 |
purkinje cell autoaibody,PCA-1/Yo ELISA Kit | 美人鱼发光杆菌PCR试剂盒 |
acylated ghrelin,AG ELISA Kit | flagellin 人鞭毛蛋白ELISA检测试剂盒 |
Protocadherin Beta 11(PCDHb11)ELISA Kit | FLU 人流感病毒抗体IgGELISA检测试剂盒 |
Pulmonary surfatca-associated protein C,SP-C ELISA Kit | WR19L细胞突触囊泡蛋白ⅩⅢ(SYT13)ELISA试剂盒 |
Col ELISA Kit | FPA 人血纤肽/纤维蛋白肽AELISA检测试剂盒 |
CD40L/TNFSF5 (Cluster of Differeiation 40 Ligand)ELISA Kit | FSH 猴子促卵泡suELISA检测试剂盒 |