PAT基因检测试剂盒（PCR-荧光探针法）
【注意事项】
1．PCR 操作各阶段应严格分区操作，避免交叉污染。
2．试剂盒各组分使用前应充分融化混匀，离心数秒后使用。
3．各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4．待测标本若不及时检测，应保存于-20℃或-70℃。
5．样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6．PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7．本试剂盒仅用于科研使用，不做为临床诊断使用。
商品属性：
产品名称 | 规格 | 货号 |
PAT基因检测试剂盒（PCR-荧光探针法） | 48T | AP3393 |
【检测方法】
1 ． 试剂准备（试剂准备区）
将试剂盒各组分置4℃避光融化，充分混匀后瞬间离心。计算试剂使用份数 N（N=样本数+1 管阳性对照+1 管阴性对照），根据下表配置反应体系mix，加入一适当体积离心管中，充分混匀后瞬间离心，按 20μL 分装至 PCR 反应管/板，并转移至样本处理区。
组分 | 体积（μL ） |
qPCR 预混液（含酶） | 16 |
引物探针 | 4 |
总体积（反应体系 mix ） | 20 |
2 ． 样本处理（样本处理区）
① 核酸提取
选择合适的盒提取核酸，具体按照相应的试剂盒说明书操作。
② 加样
在已加入反应体系mix 的 PCR 反应管/板上分别加入处理好的待检标本核酸、阴性对照、阳性对照各 5μL，终体积为 25μL。
盖紧管盖或封膜，瞬间低速离心后置荧光 PCR 检测仪扩增。
3 ． 扩增检测（核酸扩增区）
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
①预变性 | 95℃ | 5min | 1cycle |
②变性 退火/延伸/检测荧光 | 95℃ 55℃ | 10s 40s | 40cycles |
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