pCaMV35S基因检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
商品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
pCaMV35S基因检测试剂盒(PCR-荧光探针法) | 48T | AP3399 |
【检测方法】
1 . 试剂准备(试剂准备区)
将试剂盒各组分置4℃避光融化,充分混匀后瞬间离心。计算试剂使用份数 N(N=样本数+1 管阳性对照+1 管阴性对照),根据下表配置反应体系mix,加入一适当体积离心管中,充分混匀后瞬间离心,按 20μL 分装至 PCR 反应管/板,并转移至样本处理区。
组分 | 体积(μL ) |
qPCR 预混液(含酶) | 16 |
引物探针 | 4 |
总体积(反应体系 mix ) | 20 |
2 . 样本处理(样本处理区)
① 核酸提取
选择合适的盒提取核酸,具体按照相应的试剂盒说明书操作。
② 加样
在已加入反应体系mix 的 PCR 反应管/板上分别加入处理好的待检标本核酸、阴性对照、阳性对照各 5μL,终体积为 25μL。
盖紧管盖或封膜,瞬间低速离心后置荧光 PCR 检测仪扩增。
3 . 扩增检测(核酸扩增区)
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
①预变性 | 95℃ | 5min | 1cycle |
②变性 退火/延伸/检测荧光 | 95℃ 55℃ | 10s 40s | 40cycles |
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