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人科研PCR检测试剂盒厂家

  • 更新时间:  2020-03-30
  • 产品型号:  
  • 简单描述
  • 人科研PCR检测试剂盒厂家是即用型PCR试剂盒的改良产品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等所有PCR 所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行PCR 反应,具有广泛的用途。
详细介绍

特点:
高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
高灵敏度:检测灵敏度可达10~100;
操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

产品名称

科研PCR检测试剂盒厂家

英文名称

Human Coronavirus(HCoV)OC4 RTPCR

分类

PCR检测试剂盒

样品 DNA 的制备:
1.用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀释阳性对照(以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 片段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头,在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中,得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

使用及效果:
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

ELISAKitforHumanDnaJhomologsubfamilyCmember2797230-47-2  20mg Picfeltarraenin ⅠA 1.56-100 ng/mL苦玄参苷IA

ELISAKitforHumanInterleukin-6receptorsubunitalpha114906-74-010mg Ciwujianoside C3 62.5-4000 pg/mL刺五加苷C3

EC肉汤5g 250gCytidine 胞苷(胞嘧啶核苷)

人基质金属蛋白酶10(MMP-10/SL-2)ELISA试剂盒10mg 78-5000 pg/ml5-氨基乙酰丙酸 AMINOLEVULINIC ACID, 5-(RG)

麦芽糖291-77401 20支高灵敏度激酶荧光检测试剂盒 Wako新产品

ELISAKitforHumanSphingosine-1-phosphatelyase110mg 78-5000 pg/mL穿心莲内酯 DEOXY-11,12-DIDEHYDROANDROGRAPHOLIDE, 14-(P)

人细胞,C33A细胞 20mg HPLC≥98%6-Hydroxy-7-methoxy-4-phenylcoumarin黄檀素 482-83-71 x 10^6 cells/T25培养瓶黄檀素;6-羟基-7-氧基-4-苯基香豆素

ELISAKitforHumanAlkalinephosphatase,placentaltype207446-92-2 20mgArteannuin A HPLC≥98% 15.6-1000 pg/mL青素;A; 黄花蒿素 A

人多药耐药蛋白3(MDR3)ELISA试剂盒38763-29-0 20mgWorenine HPLC≥98% 62.5-4000 pg/mL基黄连碱

TOP2A抗體,兔多抗,抗原親和純化 118-00-3 100mg 0.991WB   IHC-P   IF  ICC/IF   鸟嘌呤核苷-(鸟甙)

ELISAKitforHumanE3ubiquitin-proteinligaseCBL-B19879-30-2 20mg Bavachinin A 7.8-500 ng/mL补骨脂二氢黄

TPSB2/TryptaseBeta2抗體,鼠單抗82508-32-5A0717ELISA   土槿皮酸

人凝血因子Ⅹ(F10)ELISA试剂盒19309-14-9 20mg Cardamonin 0.156-10 ng/mL小豆蔻明

BLVRB抗體,兔多抗521-61-9C16H12O5Physcion≥98%ELISA   大黄素

ELISAKitforHumanLa-relatedprotein7500G 78-5000 pg/mL1-苄基-1-苯肼 1-Benzyl-1-phenylhydrazine Hydrochloride >98.0%(T)

Honda氏产毒肉汤25g 250gSephadex G-15 medium(葡聚糖凝胶G-15)

科研PCR检测试剂盒厂家1,9-二脱氧福斯高林 DIDEOXYFORSKOLIN, 1,9-(AS)  5mg ELISAKitforHumanKallikrein-2

辣椒素 PSEUDOCAPSAICIN(NONIVAMIDE)(P)  100mg 人胸腺素β4(Tbeta-4)ELISA试剂盒

异阿魏酸;3-羟基-4-氧基肉桂酸 20mg 3-Hydroxy-4-methoxycinnamic acid 人周期蛋白依赖性激酶激活剂1ELISA试剂盒 HPLC≥98%

改良型石炭酸复红染液(苯品红染液)  100ml/500ml 磷酸盐缓冲液(pH7.2)

青藤碱  HPLC≥98% Sinomenine 兔星形胶质细胞 用于含量测定

4'-溴苯乙 4'-Bromoacetophenone >97.0%(GC)  500G 人胃动素(MTL)ELISA试剂盒

Protamine sulfate sale鱼精蛋白硫酸盐  1g 5g 牛津琼脂(OXA)基础

安格洛甙C HPLC≥98% 115909-22-3 INA抗體,兔多抗,抗原親和純化

 


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