LS174T人结直肠腺癌细胞
LS174T人结直肠腺癌细胞
名称 | LS 174T [LS174T] (人结肠腺癌细胞) (STR鉴定正确) |
别称 | Ls174T; LS174t; Ls-174-T; LS-174-T; LS 174 T; LS-174T; Ls-174T; LS 174T; LS-174; LS174 |
种属 | 人类 |
年龄（性别） | 女性，58岁 |
组织来源 | 直肠；结直肠腺癌 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
背景描述 | LS 174T细胞是LS 180细胞的胰蛋酶化变种。LS 174T细胞比亲本更易传代，像LS 180细胞一样生成大量的癌胚抗原(CEA)。电镜研究表明，LS 174T细胞有丰富的微丝和细胞质粘液素液泡。LS 174T细胞直肠抗原3阳性；p53抗原表达阴性，但mRNA表达阳性。LS 174T细胞角蛋白染色阳性；LS 174T细胞癌基因c-myc、N-myc、H-ras、N-ras、Myb和fos的表达呈阳性；癌基因k-ras和sis的表达未做检测。 |
生物安全等级 | 1 |
生长培养基 | MEM(PM150467 ATCC改良)＋10% FBS(164210-500)＋1% P/S(PB180120) |
推荐传代比例 | 1:2-1:4 |
推荐换液频率 | 2~3次/周 |
倍增时间 | ~30-40小时 |
冻存条件 | 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度：液氮 |
培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃ |
致瘤性 | Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells). |
抗原表达情况 | serologically defined colon cancer antigen 3; Homo sapiens, expressedHLA A2, B13, B50; Blood Type O |
基因表达情况 | carcinoembryonic antigen (CEA), interleukin 10 (IL-10), interleukin 6 (IL-6), mucinThe production of CEA in the ATCC seed stock was 1944 ng per 10^6 cells in 10 days. |
保藏机构 | ATCC; CL-188 ATCC; CCL-188BCRC; 60053 DSMZ; ACC-759 ECACC; 87060401 |
二、细胞培养操作
1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
三、培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，用新鲜的培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代。
9. 注意： 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
公司正在出售的产品：
FⅨ ELISA Kit | 核桃源性成分PCR试剂盒 |
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VCAM-1 ELISA Kit | LS174T人结直肠腺癌细胞肿瘤坏死因子超家族15(TL1A/TNFSF15)ELISA试剂盒 |
Adenylate Cyclase 4(ADCY4)ELISA Kit | ⅡA组磷脂A2(PLA2G2A)ELISA试剂盒 |
Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule，ALCAM ELISA Kit | Ⅲ型胶原蛋白(COL Ⅲ)ELISA试剂盒 |
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