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链霉亲和素磁珠

  • 更新时间:  2023-09-28
  • 产品型号:  A-Hc2060
  • 简单描述
  • 链霉亲和素磁珠是一种高度均匀的超顺磁性微球,表面包覆着高密度的超纯链霉亲和素(>97%)。
详细介绍

商品属性:

产品名称

规格

货号

链霉亲和素磁珠

1ml10mg/ml

A-Hc2060

产品介绍:

链霉亲和素磁珠是一种高度均匀的超顺磁性微球,表面包覆着高密度的超纯链霉亲和素(>97%)。微球经过专门设计、测试和质量控制,可用于免疫沉淀、细胞分选、快速单步捕获生物su化分子,如 DNA、RNA、抗体或细胞裂解物或杂交反应中的蛋白质等。链霉亲和素(或抗生素多倍体)和生物su之间的相互作用表现出已知的最高非共价相互作用之一。抗生物su、链霉亲和素、单体抗生物su及其类似物已成为探针和亲和配体的有力工具,在生化分析、诊断、亲和纯化和药物传递等领域有着广泛的应用。链霉亲和素是一种四聚体生物su结合蛋白,源于链霉菌亲和素 II,质量为 60000 道尔顿。链霉亲和素不含碳水化合物,pI 较低,非特异性结合程度较低,使链霉亲和素成为许多检测系统的理想试剂选择。
产品特点: 使用链霉亲和素-生物su结合系统的优点和益处:
·亲和力:链霉亲和素是同源四聚体,具有较高的生物su结合亲和力,具有KD~10−14 米。
·高稳定性:生物su结合复合物具有优异的稳定性,可抵抗 pH、温度(2°C 和40°C)、苛刻的有机溶剂、变性剂(如氯化胍)、洗涤剂(如 SDS)和蛋白水解酶。
·突出的选择性和特异性:生物su和链霉亲和素的相互作用具有高度的特异性,确保了较低的非特异性结合。
·高灵敏度:高稳定性和特异性确保了高检测灵敏度。
·非常灵活:生物su的小尺寸和显著稳定性被证明非常适合相对容易地并入各种分子,例如合成聚合物、荧光团、小分子或生物分子中的特定位置,从而对共轭生物分子的结构和功能施加最小的扰动。
链霉亲和素磁性微球的优点:

·快速、简单且一步到位的高通量程序:消除了柱状物或过滤器,或重复费力的移液或 离心(图 1) ·高结合能力 ·表现出较低的非特异性结合 ·可扩展-可轻松调整样本大小和自动化

产品属性:

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所需材料 ·
Binding Buffer: 1x PBS, 0.1% BSA, pH 7.4 ·磁力分离器(适用于手动操作): 根据实验时生物样品的体积,使用者可以选择以下不同型号的磁力分离器: 8孔磁力架 可以容纳8个单独的1.5-2.0 ml 离心管 ; 24孔磁力架可以容纳24个单独的1.5-2.0 ml离心管; 4孔磁力-15可以容纳 4个单独的15ml离心管; 4孔磁力架-50可以容纳四个单独的50 ml离心 管。

操作过程:
注: · 该方案是一种通用亲和纯化程序。为了获得最佳结果,每个用户应确定纯化单个目标蛋白的最佳工作条件。
·根据粗样品中目标生物su化分子的数量(基于珠子结合能力),优化每种应用中使用的珠子数量。使用过多的磁珠会导致背景较高,而使用过少的磁珠会导致产量较低。
1. 将最佳量的珠子转移到离心管中。将管放在磁力架上1-3分钟。在管留在分离器上的同时去除上清液。
2. 取下试管,用5倍体积的 1x Binding/Washing Buffer通过涡流清洗珠子30秒。将试管置于室温下1-3分钟。将管放在磁力架上1-3分钟。在管留在分离器上的同时去除上清液。
3. 重复步骤二两次。
向含有目标分子的粗样品中加入洗涤过的珠子,并在室温或所需温度下培养1-2小时(温度越低,培养时间越长)。
注: 强烈建议进行滴定以优化培养时间。更长时间的孵育可能导致更高的背景。
4. 如步骤 2 所述清洗磁珠,直到 280 nm 处洗脱液的吸光度接近背景水平(OD280<0.05)。
注: 添加更高浓度的盐、非离子洗涤剂和还原剂可降低非特异性背景。例如,向洗涤缓冲液中添加NaCl(高达1-1.5 M)、0.1-0.5%的非离子洗涤剂,如Triton X 100或吐温20。


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