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Bst 4.0 Basic Mix(with UDG)

  • 更新时间:  2023-10-20
  • 产品型号:  A-PJ1013
  • 简单描述
  • Bst 4.0 Basic Mix(with UDG)储存:-20℃保存 1 年;-80℃保存 2 年;短期使用放置于2-8℃,保存 1 个月。反复冻融 10 次,不影响使用。如有白色沉淀,于 37℃水浴放置 10min 后溶解沉淀,不影响使用。
详细介绍

商品属性:

产品名称

规格

货号

Bst 4.0 Basic Mix(with UDG)

100T2000Tx25μl

A-PJ1013

产品介绍:

该制品为双组分的试剂,Basic Buffer Mix 包含了反应缓冲液、Mg2+、dU/A/C/GTP(不含 dTTP)、冻干赋形剂,酶 Mix 包含 Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶、热敏 UDG。得益于 Bst 4.0 识别 dUTP 底物,反应底物中不包含dTTP,因此扩增产物均为 dUTP 产物,在配合热敏 UDG的情况下,实现防污染性能。在实际测试中,含有 10e5Copies 的污染物的条件下,抑制污染扩增。本制品尤其适用于开盖的 LAMP 反应(如试纸条检测)、密封腔体(污染风险较高)的检测试验(如定量 PCR腔体)。
试剂使用特点:
(1)Basic Buffer Mix 中不含染料,可自行添加 SYBR Green、Eva Green 等染料进行荧光检测。
(2)本试剂适用于开盖检测如核酸试纸条检测。
(3)试剂中含有冻干赋形剂,试剂可直接冻干,无需再优化冻干配方。
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储存:-20℃保存 1 年;-80℃保存 2 年;短期使用放置于2-8℃,保存 1 个月。反复冻融 10 次,不影响使用。如有白色沉淀,于 37℃水浴放置 10min 后溶解沉淀,不影响使用。
使用方法:
1. 配制 LAMP 反应体系
2.5xBst4.0 Basic BufferMix 10 μl
25xBst4.0/UDG Enzyme 1 μl
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到总体积 25 μl
10xLAMP Primer Mix 浓度:FIP/BIP 分别为 16 μM、LoopF/B 分别为 4~8 μM、F3/B3 分别为 2 μM。
注意:如何应用核酸试纸条进行特异性检测,可来信咨询。
2. 反应体系配好后,室温(25-37°C)放置 2min,以消化去除潜在的核酸污染,随后置于 65°C 进行反应15~30min。
试剂冻干策略(有冻干经验人员操作):
1. 配制 LAMP 冻干体系
2.5xBst4.0 Basic BufferMix 10 μl
25xBst4.0/UDG Enzyme 1 μl
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
ddH2O 到体积 1.5 μl
冻干总体积 15 μl
2. 体系配制完毕后,加入 0.2 ml EP 管进行上机冻干。该试剂的冻干体积为 15 μl, 检测反应体积为 25 μl。

特别说明:
(1)本试剂防污染原理为:热敏 UDG 消化去除含有 dUTP的扩增产物,热敏 UDG 在随后 50℃以上迅速失活,并不影响后续 LAMP 扩增。因此,本试剂无法去除采用 dTTP扩增的污染物,也不能消化天然的核酸底物(DNA/RNA)。为避免扩增气溶胶污染,实验室应长期使用本试剂进行实验,一旦使用 dTTP 试剂扩增后,造成实验室污染,采用本试剂不会消除假阳性扩增。
(2)本试剂适用基于 OG 染料变色法、SYBR Green 法、基于 Biotin/FAM 探针的核酸胶体金法( 具有胶体金法特异性使用策略,如需技术支持,请来信咨询)。本试剂不支持 HNB、pH 显色法。其它使用策略自行优化调整。
(3)基于本试剂, 提供冻干制备服务。八联管起订量 480T,冻干球起订量 2000T。


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