您好,欢迎进入上海抚生实业有限公司网站!
一键分享网站到:
产品搜索
PRODUCT SEARCH
产品分类
PRODUCT CLASSIFICATION
相关文章
RELEVANT ARTICLES
您现在的位置:首页 >> 产品中心 >> PCR试剂盒 >> 探针法荧光定量PCR试剂盒 >> 弓形杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒

弓形杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒

  • 更新时间:  2022-06-17
  • 产品型号:  
  • 简单描述
  • 弓形杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒及公司销售的各类产品紫檀芪(标准品) Pterostilbene 质量规格:,标准品 人水通道蛋白1(AQP-1)检测试剂盒HumanAquaporin1,AQP-1
    紫檀芪,紫檀 Pterostilbene 质量规格:>99%,BR 大鼠水通道蛋白5(AQP-5)试剂盒 Rat Aquaporin 5,AQP-5
    鱼藤酮 Rotenone
详细介绍

特点优势:
1.   特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%
2.  
重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%
3.  
灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4.  
实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5.  
优势1:序列资源丰富,除TIANDZ公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6.  
优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。

9.jpg

产品名称

英文名称

货号

弓形杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒

Arcobacter spp.

AP96003

我们的科研实验室:

QQ图片20220614145332.jpg

产品特点:
1. 使用化学修饰的热启动聚合酶,反应特异性高,*程度地避免了非特异扩增;
2.
反应缓冲液经充分优化,反应灵敏快速,40个循环只需20多分钟;
3.
抗干扰能力强,反应重复性高,适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。
PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
特异性荧光标记:
TaqMan

TaqMan
探针的特性:
15′端标记有报告基团(Reporter, R),如FAMVIC
23′端标记有荧光淬灭基团 (Quencher, Q
3)探针完整,R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ,无荧光, RQ分开,发荧光
4Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探针
相对定量通过内标定量:
内标(Endogenous Control)通常是β-actinGAPDH基因等看家基因,在细胞中的表达量或在基因组中的拷贝数恒定,受环境因素影响小,内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA
模板
2
.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3
10×PCR Buffer
4
2mM dNTPmix:含dATPdCTPdGTPdTTP2mM
5
Taq
二、操作步骤
1
.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物110pM               2μl
引物210PM              2μl
Taq
酶(2U/μl            1μl
DNA
模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2
.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min
3
.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4
PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。设立一个专用的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
PCR检测方法包括以下步骤:
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)
待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为11。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。
步骤(2)为:待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。

G0/G1期开关基因(G0S2)elisa分析检测试剂盒

G0/G1期开关基因(G0S2)elisa检测试剂盒

H5型病毒(H5N1)抗体(IgG)elisa分析检测试剂盒

H5型病毒(H5N1)抗体(IgG)elisa检测试剂盒免费代测

HSP27 IgM 抗体elisa分析检测试剂盒
HumanEotaxin1
试剂盒人嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)试剂盒 

Humaneosinophilchemotacticfactor,ECF试剂盒人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)试剂盒  (1S,2R)-1-Amino-2-indanol  126456-43-7  中文名:(1S,2R)-1-氨基-2-茚醇  分子式:C9H11NO 

Humaneosinophilcationicprotein,ECP试剂盒人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)试剂盒  (1S,2R)-2-Amino-1,2-diphenylethanol  中文名:(1S,2R)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇  分子式:C14H15NO 

humaneosinophil-associatedribonucleaseAfamilymember3,EAR3试剂盒人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员3(EAR3)试剂盒  ((2-cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)quinolin-3-yl)methyl)triphenylphosphonium bromide  154057-58-6  中文名:  分子式:C37H30BrFNP 

humaneosinophil-associatedribonucleaseAfamilymember2试剂盒人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员2(EAR2)试剂盒  (-)-Mandelic acid benzyl ester  中文名:D-(-)-扁桃酸苄酯  分子式:C15H14O3
小鼠组织因子(TF)elisa检测试剂盒
弓形杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒细胞冻存液50ml

细胞冻存液100ml

细胞凋亡形态学检测试剂盒100T

细胞凋亡检测试剂盒 20T

细胞凋亡检测
公司产品仅供科研使用产品特性: 高特异性:本产品采用热启动 DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有扩增活性,可大大提高 PCR 产物的特 异性。 灵敏度:本产品包含的优化的缓冲液可检测低拷贝数的模板,且重复性好。 高适用性:本产品可适用于任意荧光定量 PCR 仪。


留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
    QQ在线客服
  •   在线咨询
  • 点击这里给我发消息
电话
021-52961052
手机
18201748966