科研抗体
特点:
高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
高灵敏度:检测灵敏度可达10~100;
操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
产品名称 | 科研抗体 |
规格
| 详见说明书 |
分类 | PCR检测试剂盒 |
样品 DNA 的制备:
1.用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀释阳性对照(以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 片段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头,在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中,得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
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使用及效果:
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
Phospho-YAP1(Ser127) 磷酸化原基因Yes相关蛋白1抗体 规格: 0.1mlNOXA2/p67phox NADPH氧化酶活化蛋白1抗体 规格: 0.1ml 2-羟-6-氯喹喔啉分子式:180.59英文名称:2- hydroxy -6- dichloro quinoxalineCAS号:2427-71-6分子量: C8H5ClN2O
NT5C1A 胞质5'核苷酸酶1A抗体 规格: 0.2ml Adenine 腺嘌呤 5g 瓶
PAPSS2 苷酸硫酸激酶2抗体 规格: 0.2ml 匹多莫德英文名称:Pi do Maude分子式:244.27分子量: C9H12N2O4SCAS号:121808-62-6
BRLF1 立即早期基因BRLF1抗体(鼻咽基因) 0.2mlPhospho-HP1 gamma (Ser93) 磷酸化染色质相关蛋白1-γ抗体 规格: 0.1ml Kanamycin mono sulfate 硫酸卡那霉素 25389-94-0 100mg
CXCR7/RDC1 细胞表面趋化因子受体7抗体 规格: 0.1ml 3,4,7,8-四甲-1,10-菲罗啉分子式:236.32英文名称:3,4,7,8- four methyl -1,10-CAS号:1660-93-1分子量: C16H16N2
PDZK3 前列激活蛋白抗体 规格: 0.2mlBCMP11/AGR3 膜蛋白11抗体(前梯度同源蛋白2) 规格: 0.2ml DMEM (低) 10×1L 盒
Bolton肉汤配套试剂 规格: 10支/盒 用途: 每支添加于100mL的 Bolton 肉汤基础中 5-喹啉分子式:145.16英文名称:5-, the alcoholCAS号:578-67-6分子量: C9H7NO
小鼠腺英文名称:EMT-6 硫酸喹啉分子式:227.24英文名称:SulfateCAS号:54957-90-3分子量: C9H7·H2SO4N
CQ028 多基因下调蛋白抗体 规格: 0.2ml Methyl Linoleate 亚油酸甲酯 112-63-0 100mg
白介素15(IL15)重组蛋白英文名称:Recombinant Interleukin 15 (IL15) 1,3-二羟甲-5,5-二甲海因英文名称:1,3- hydroxymethyl-2 -5,5- two methyl hydantoin分子式:188.18分子量: C7H12N2O4CAS号:6440-58-0
HAS1/Hyaluronan synthase 1 透明质酸合成酶1抗体 规格: 0.1ml Papain 木瓜蛋白酶 25g 瓶
NETO1 脑低密度脂蛋白受体蛋白1抗体 规格: 0.2ml 3-氯-2-吡分子式:138.55英文名称:3- chloro -2- cyanopyridineCAS号:38180-46-0分子量: C6H3ClN2
BAFF/CD257 TNF家族B细胞激活因子抗体 规格: 0.2ml 羊抗小鼠IgG-FITC 0.3ml 支
PLK1 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Plk1抗体 规格: 0.1ml 植物基因组DNA提取试剂盒 50T 盒
Phospho-TrkA (Tyr674/675)/TrkB (Tyr706/707) 磷酸化酪氨酸激酶A抗体 规格: 0.1mlFSP/Spastin 纤维母细胞表面蛋白抗体 规格: 0.1ml N-BOC-1,2,3,6-四氢吡分子式:183.25英文名称:N-BOC-1,2,3,6- fourCAS号:85838-94-4分子量: C10H17NO2
Cadherin 10 钙粘附分子10抗体 规格: 0.2ml 2,2-联吡分子式:156.18英文名称:2,2- UnionCAS号:366-18-7分子量: C10H8N2
科研抗体 白介素16(IL16)重组蛋白英文名称:Recombinant Interleukin 16 (IL16) 4-甲硫酸氢氯酸嘧分子式:221.7英文名称:4- methyl benzyl sulfateCAS号:4393-16-2分子量: C8H12ClNO2S
EIF2C1/Ago1 真核翻译起始因子2C1抗体 规格: 0.2ml Physcion 大黄素甲 521-61-9 20mg
玻连蛋白(VTN)重组蛋白英文名称:Recombinant Vitronectin (VTN) 重酸氢钾分子式:389.91英文名称:Potassium hydrogen carbonateCAS号:13455-24-8分子量: KHI2O6
Donkey Anti-Guinea pig IgG/FITC FITC标记的驴抗豚鼠IgG 规格: 0.3ml 过酸-雪夫(AB-PAS)染色试剂盒 6×50ml 盒
凝血因子Ⅱ(F2)重组蛋白英文名称:Recombinant Coagulation Factor II (F2) 4-甲-3,5-二吡分子式:250.92英文名称:4- methyl -3,5- dibromopyridineCAS号:3430-23-7分子量: C6H5Br2N
IDH1/Isocitrate dehydrogenase 异柠檬酸脱酶1抗体 规格: 0.2ml 缬沙坦英文名称:Valsartan分子式:435.52分子量: C24H29N5O3CAS号:137862-53-4
ANKLE2 ANKLE2蛋白抗体 规格: 0.2ml L-Carnitine inner salt 左旋肉碱 541-15-1 20mg
Smad2 细胞信号转导分子Smad-2抗体 规格: 0.1mlPOT1 端粒保护蛋白1抗体 规格: 0.2ml PCR板(半裙边)(0.2ml) 96孔 块